准备SDS-PAGE实验试剂

本文章对于准备SDS-PAGE实验试剂和一些sds page胶回收试剂盒的题进行讲解，希望能帮助到大家。

SDS-PAGE凝胶制备是实验室最常规的工作，刚开始蛋白质实验时，总是要查阅凝胶制备实验所用试剂的配方，这里总结一下凝胶分离、叠胶、分离。凝胶和浓缩胶缓冲液、考马斯亮蓝染色溶液、样品缓冲液、电泳缓冲液和其他配方。1分离胶12

准备

所需试剂

所需金额

凝胶分离12%

丙烯酰胺30%

60毫升

15mol/lTris-HCl

38毫升

10SDS

150l

10过硫酸铵

150l

泰梅德

6l

蒸馏水

49毫升

2浓缩凝胶5

准备

所需试剂

所需金额

浓缩凝胶5%

丙烯酰胺30%

13毫升

15mol/lTris-HCl

10毫升

10SDS

80l

10过硫酸铵

80l

泰梅德

8l

蒸馏水

55毫升

3凝胶缓冲液pH89分离

准备

所需试剂

所需金额

凝胶缓冲液分离

特里斯

366克

1摩尔/升盐酸

48毫升

蒸馏水

配制至100ml

4堆积凝胶缓冲液pH67

准备

所需试剂

所需金额

浓缩胶缓冲液

特里斯

598克

1摩尔/升盐酸

48毫升

蒸馏水

配制至100ml

530丙烯酰胺pH70

准备

所需试剂

所需金额

30丙烯酰胺

丙烯酰胺

29克

亚甲基双丙烯酰胺

1克

蒸馏水

配制至100ml

610过硫酸铵W/V将1g过硫酸铵溶解在10ml水中，在4下保存数周，然后新鲜使用。710SDS将10gSDS溶解于80ml双蒸水中，轻轻搅拌，如果室温较低，可水浴加热溶解，然后调整至100ml，室温保存。8个样本缓冲区

准备

所需试剂

所需金额

样品缓冲液

1MTris-HCl

5毫升

安全数据表

25克

巯基乙醇

1毫升

溴酚蓝

005克

蔗糖

10克

蒸馏水

容量可达100ml

9考马斯亮蓝染色液将025g考马斯亮蓝R-250溶解于少量甲醇中，然后加入40ml甲醇和10ml乙酸水溶液并稀释至100ml。10Tris-甘氨酸电泳缓冲液pH83

准备

所需试剂

所需金额

Tris-甘氨酸电泳缓冲液

特里斯巴斯

151克

甘氨酸

94克

10%十二烷基硫酸钠

50毫升

去离子水

配制至100ml

制备凝胶所需试剂的母液不能放置太久，有条件的实验室可将母液保存在4度冰箱中，防止母液被微生物污染或出现沉淀。

谁能解释一下SDS-PAGE中SDS的详细机制吗？SDS是一种阴离子去垢剂、变性剂和增溶剂，可以破坏分子内和分子间氢键，使分子松散，破坏蛋白质分子的二级和结构。

强还原剂如巯基乙醇和二硫苏糖醇可以破坏半胱氨酸残基之间的二硫键。样品和凝胶中添加还原剂和SDS后，分子解聚成多肽链，解聚的氨基酸侧链与SDS结合形成蛋白质-SDS胶束，其所带负电荷大大超过蛋白质原有电荷.从而消除不同分子之间的电荷差异和结构差异。

如何储存我的SDS溶液？SDS-PAGE中使用的溶液的保质期通常约为1个月。但10SDS溶液的有效期为一周，必须在室温下保存。4摄氏度下储存时会结晶。AP的有效期也是一周。

室温保存，使用前若溶液中有白色晶体沉淀，则放入干燥箱中加热，直至晶体完全溶解，溶液变得透明。

我可以将SDS试剂倒入下水道吗？SDS是一种已知会使蛋白质变性的去垢剂。用于聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质的分子量。它还可用于核酸提取，破坏细胞壁并裂解核酸。蛋白质复合物在乳液中聚合。它可以作为反应中两相溶液的乳化剂。

不可以，必须将其倒入废物容器中并由化学废物公司员工回收。

该液体长期可能会污染水环境并产生其他不良影响，因此不应将其倒入下水道，而应倒入废物容器中并由专门部门回收。与空气混合、加热并暴露于火焰时会爆炸。