液相色谱的工作原理，高效液相色谱的基本原理、应用及常见缺陷-资源分析-韩韩H5开发

网友多想了解一些关于高效液相色谱的基本原理、应用及常见缺陷和一些液相色谱的工作原理的相关题，下面让小编带大家走进高效液相色谱的基本原理、应用及常见缺陷的案吧。

1.高效液相色谱仪的系统配置及工作原理

高效液相色谱系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等部件组成。由于样品溶液的每种成分具有不同的分布，因此储液器中的流动相通过高压泵引入到系统中。两相系数，当两相相互相对运动时，通过反复的吸附-脱附分配过程，各组分的运动速度差异较大，被分离成单独的组分，并依次流出塔外。此时，样品的浓度被电转换为信号并发送到记录仪，并以图表形式输出数据。

2.高效液相色谱法的应用

高效液相色谱仅需要将样品溶解，不受样品挥发性的。有多种流动相可供选择，也有多种固定相可实现分离。它们是热不稳定、非挥发性、离解和非离解物质，具有较宽的分子量范围。HPLC的高分辨率和灵敏度与样品制备技术相结合，能够分离和同时测量性质非常相似的物质以及复杂相中痕量成分的分离。

固定相的发展使得在充分保持生化物质活性的条件下完成生化物质的分离成为可能。HPLC已成为解决生化分析题最有前途的方法。高效液相色谱法具有分辨率高、灵敏度高、速度快、色谱柱可重复使用、流出物成分易于收集等优点，广泛应用于生物化学、食品分析、药物研究、环境分析、无机分析等各个领域。高效液相色谱与结构设备的联合使用是一个重要的发展方向。液相色谱-质谱技术受到广泛关注，例如用于氨基甲酸酯农药和多环芳烃的分析，液相色谱-红外光谱技术也迅速发展，例如用于环境污染分析中水和海水中碳氢化合物的测定。挥发性碳氢化合物使环境污染分析取得新进展。

3、解决高效液相色谱仪常见题

LC-10AT高效液相色谱仪是日本岛津公司1996年生产的产品。检测器为可变波长紫外检测器，色谱柱为岛津公司ODS-C18和大连艾利特公司ODS-C18。八年的日常工作导致了一些小故障。例如，缺陷1在咨询岛津工程师后得到解决，缺陷2是经常发生的题，等等。现将专项任务概括如下

缺陷1流动相中有气泡。关闭泵，打开泄压阀，打开吹扫按钮，清洗并排除气体。多次，气泡不断从过滤器进入流动相。如果清除按钮打开，则无法清除持续产生的泡沫。

原因是，如果过滤器长时间浸泡在醋酸铵等缓冲溶液中，霉菌会在过滤器内部生长繁殖，使缓冲溶液难以通过。过滤器移动平稳，泵的压力迫使空气通过过滤器。

您也可以将过滤器浸泡在硝酸盐溶液中，然后用超声波清洗几分钟。另外，将过滤器浸泡在五硝酸溶液中12至36小时，轻轻摇动数次，然后用清水清洗数次。打开泄压阀，打开吹扫按钮，清洁并排除气体。如果过滤器仍然起泡如果过滤器没有起泡，则继续将过滤器浸泡在5硝酸溶液中。这说明过滤器内部有题。硝酸破坏真菌菌落，使流动相顺利通过过滤器。打开泄压阀，打开泵，调节流量至10-30ml/min，用清水冲洗过滤器约1小时。过滤器可以清洗。关闭泄压阀，用纯甲醇冲洗30分钟。

故障2柱压高。

这是因为缓冲盐在柱上沉淀。

在第一种情况下，首先用40-50C的纯水缓慢向前冲洗色谱柱。随着柱压逐渐降低，相应增加流速。第二种情况，如果C18柱被样品沉淀污染，则用纯水反洗柱子，然后改用甲醇进行洗涤。用甲醇+异丙醇洗柱，然后用甲醇冲洗，用纯水冲洗，最后用甲醇冲洗并正向洗柱至少30分钟。

一、液相色谱仪原理？

液相色谱的原理是基于样品与液流中的固定相的相互作用来分离组分。首先，样品溶解在流动相中，然后通过进样器进入色谱柱。色谱柱充满固定相，通常是具有特定化学性质的固体颗粒。样品与由流动相驱动的固定相相互作用。不同组分在相互作用力的影响下以不同的速度通过色谱柱，实现分离。在柱后面的检测器中，检测到的信号被转换成电信号，由数据系统进行分析和处理。最后，我们获得了每个组件的峰值图。

HPLC的主要分离机制包括吸附、离子交换、分布和排除。根据您的需要，您可以选择不同的固定相类型和流动相组成来分离和分析各种化合物。同时，色谱柱的选择也非常重要。不同的色谱柱类型和尺寸会影响分离效果。

通过控制流动相的流速、压力和温度以及优化样品制备和进样方法可以提高分离效率和灵敏度。此外，液相色谱可以与其他技术相结合，以进一步提高分析性能和准确性。